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瓊脂糖凝膠DNA回收試劑盒

瓊脂糖凝膠DNA回收試劑盒

產(chǎn)品編號:RTP2201-03

產(chǎn)品規(guī)格:200次

相關(guān)規(guī)格:
數(shù)量
價格 ¥400

瓊脂糖凝膠DNA回收試劑盒

 試劑盒內(nèi)容:

試劑盒組成

RTP2201-02 100次)

RTP2201-03200次)

溶膠液PN

100 ml

2×100 ml

3 M NaAc pH5.2

500μl

500μl

漂洗液PW

25 ml

2×25 ml

洗脫緩沖液EB

15 ml

15 ml

吸附柱CA1

100

2×100

收集管(2 ml

100

2×100

說明書

1

1

 儲存條件:

本試劑盒在室溫(15–25℃)干燥條件下,可保存12個月;更長時間的保存可置于2–8℃。(注意:當(dāng)?shù)蜏刭A存時,使用前應(yīng)先將試劑盒內(nèi)的溶液在室溫中放置一段時間,必要時可在37℃水浴中預(yù)熱10-20分鐘,以平衡溶液溫度。)

 產(chǎn)品簡介:

本試劑盒采用可以高效、專一結(jié)合DNA的硅基質(zhì)材料和獨特的緩沖液系統(tǒng),從TAE或TBE瓊脂糖凝膠上回收DNA片段,同時去除蛋白質(zhì)、其它有機化合物、無機鹽離子及寡核苷酸引物等雜質(zhì)。可回收100 bp–40 kb大小的片段,回收率大于80%(<100 bp 和>10kb 的DNA片段回收率為30-50 %)。

每個吸附柱每次最多可吸附的DNA量約為20 μg。

使用本試劑盒回收的DNA可適用于各種常規(guī)操作,包括酶切、PCR、測序、文庫篩選、連接和轉(zhuǎn)化等實驗。

 

 產(chǎn)品特點:

1 溶膠液PN為亮黃色,便于觀察膠是否徹底融化和溶膠體系的pH是否合適。

2 操作快捷,單個樣品操作少于15分鐘。

 

注意事項:請務(wù)必在使用本試劑盒之前閱讀此注意事項。

1 電泳時最好換用新鮮的電泳緩沖液,以免影響電泳和回收效果;如有可能,盡量使用TAE系統(tǒng),因為有研究指出使用TBE系統(tǒng)后,回收產(chǎn)物中的痕量硼酸會影響后續(xù)的酶切反應(yīng)。

切膠時,紫外照射時間應(yīng)盡量短,以免對DNA造成損傷;請盡量去除不含目的片段的瓊脂糖凝膠,這將會對融膠很有幫助。

3 第一次使用前請按照標(biāo)簽說明在漂洗液PW中加入無水乙醇,并做好標(biāo)記,用完后緊擰瓶蓋。


 

 操作步驟:

如非指出,所有離心步驟均為使用臺式離心機在室溫下離心。

1 將單一的目的DNA條帶從瓊脂糖凝膠中切下(盡量切除多余部分)放入干凈的離心管中,稱取重量。

2 向膠塊中加入3倍體積溶膠液PN (如果凝膠重為100mg,其體積可視為100 μl,則加入300 μl溶膠液),55℃水浴放置10分鐘,其間不斷溫和地上下翻轉(zhuǎn)離心管,以確保膠塊充分溶解。

注意:

  如果此時溶膠液變?yōu)榉奂t色,請加入少量3MNaAc pH5.2(一般說來,10μl足矣),使溶膠液變?yōu)辄S色再上柱離心。

 ② 對于高濃度的凝膠(>2%),按照100mg凝膠加入100μl滅菌水和600μl溶膠液PN的比例加入溶膠液PN。

  膠塊完全溶解后最好將膠溶液溫度降至室溫再上柱,因為吸附柱在較高溫度時結(jié)合DNA的能力較弱。

3 可選步驟:當(dāng)目的片段<500bp時,如想提高回收效率,向溶膠體系種加入1/3溶膠液PN體積的異丙醇(如使用300μl溶膠液,則加入100μl異丙醇),混勻,55℃溫浴1分鐘后再進行步驟4。當(dāng)目的片段>500bp時,省略此步驟,直接進行步驟4。

4 將上一步所得溶液加入到吸附柱CA1中(吸附柱放入收集管中),室溫放置2分鐘,13,000 rpm離心60秒,倒掉收集管中的廢液,將吸附柱重新放入收集管中。

注意:

吸附柱CA的有效容積為700μl,如溶膠體系體積大于700μl,分次上柱,保證全部溶液都加到吸附柱中。

2 <100bp>10kb的片段請在室溫放置10分鐘,這將會提高回收效率。

5 向吸附柱中加入700μl漂洗液PW(使用前請先檢查是否已加入無水乙醇),13,000 rpm離心60秒,倒掉廢液,將吸附柱重新放入收集管中。

6 向吸附柱中加入500μl漂洗液PW,13,000 rpm離心30-60秒,倒掉廢液。

7 將離心吸附柱CA1放回收集管中,13,000 rpm離心2分鐘,盡量除去漂洗液。

注意:此步必不可少!如果漂洗液有殘留會影響回收效率和DNA質(zhì)量,進而影響下游實驗;離心后將吸附柱蓋子打開,室溫放置2分鐘,這樣將有助于徹底揮發(fā)殘余乙醇。

8 將吸附柱放到一個干凈離心管中,向吸附膜中間位置懸空滴加適量洗脫緩沖液EB(一般不要少于30μl),室溫放置2分鐘。13,000 rpm離心1分鐘收集DNA溶液。

注意:

1可將洗脫緩沖液EB預(yù)熱到70后再加到吸附膜上,這樣可以提高洗脫效率。

2 CA1柱的洗脫體積不應(yīng)少于30 μl,體積過小將會降低回收效率。

3洗脫液的pH值對于洗脫效率有很大影響。若用水做洗脫液應(yīng)保證其pH值在7.0-8.5范圍內(nèi),pH值低于7.0會降低洗脫效率

9 DNA產(chǎn)物-20℃保存。

 

RTP2201 瓊脂糖凝膠DNA回收試劑盒發(fā)表文章

1. [2008 IF=1.749] Development of a sequence-characterized ampli?ed region marker for diagnosis of dwarf bunt of wheat and detection of Tilletia controversa Kuhn.

Author: J.H. Liu, L. Gao, T.G. Liu and W.Q. Chen

Product: RTP2201 瓊脂糖凝膠回收試劑盒

Journal: Letters in Applied Microbiology 2009,49,235-240

InstitutionInstitute of Plant Protection ,Chinese Academy of Agricultural Sciences

Paper link https://doi.org/10.1111/j.1472-765X.2009.02645.x

 

2. [2009 IF=2.435] Characterization of three new S-alleles and development of an S-allele-specific PCR system for rapidly identifying the S-genotype in apple cultivars.

Author: Shenshan Long, Maofu Li, Zhenhai Han, Kun Wang, Tianzhong Li

Product: RTP2201瓊脂糖凝膠回收試劑盒

Journal: Tree Genetics & Genomes (2010) 6:161–168

InstitutionChina Agricultural University

Paper link https://link.springer.com/article/10.1007/s11295-009-0237-6

 

3. [2010 IF=0.921] An ISSR-based Approach for the Molecular Detection and Diagnosis of Dwarf Bunt of Wheat, Caused by Tilletia controversa Kuhn.

Author: Li Gao,Wanquan Chen and Taiguo Liu

Product: RTP2201 瓊脂糖凝膠回收試劑盒

Journal: J Phytopathol 159:155–158 (2011)

InstitutionState Key Laboratory for Biology of Plant Diseases and Insect Pests, Institute of Plant Protection, CAAS

Paper linkhttps://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1111/j.1439-0434.2010.01735.x

 

4. [2010 IF=1.359] Curing the Plasmid pXO2 from Bacillus anthracis A16 Using Plasmid Incompatibility.

Author: Huagui Wang, Xiankai Liu, Erling Feng, Li Zhu, Dongshu Wang, Xiangru Liao, Hengliang Wang

Product: RTP2201 瓊脂糖凝膠回收試劑盒

Journal: Curr Microbiol (2011) 62:703–709

InstitutionState Key Laboratory of Pathogen and Biosecurity, Beijing Institute of Biotechnology

Paper linkhttps://link.springer.com/article/10.1007/s00284-010-9767-2

 

5. [2010 IF=1.993] Computation-assisted SiteFinding-PCR for isolating flanking sequence tags in rice

Author: Hongru Wang, Jun Fang, Chengzheng Liang, Minghui He, Qiye Li, and Chengcai Chu

Product: RTP2201 瓊脂糖凝膠回收試劑盒

Journal: BioTechniques Vol. 51 | No. 6 | 2011

InstitutionInstitute of Genetics and Developmental Biology, Chinese Academy of Sciences

Paper linkhttps://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22150334/

 

6. [2013 IF=1.687] Tobacco Arabinogalactan Protein NtEPc Can Promote Banana (Musa AAA) Somatic Embryogenesis.

Author: H. Shu & L. Xu & Z. Li & J. Li & Z. Jin & S. Chang

Product: RTP2201 瓊脂糖凝膠回收試劑盒

Journal: Appl Biochem Biotechnol (2014) 174:2818–2826

InstitutionHaikou Experimental Station, Chinese Academy of Tropical Agricultural Sciences

Paper linkhttps://link.springer.com/article/10.1007/s12010-014-1228-0

 

7. [2020 IF=1.857] Characterization and Developmental Expression Patterns of Four Hexamerin Genes in the Bumble Bee, Bombus terrestris (Hymenoptera: Apidae).

Author: Yakai Tian, Yingping Qu,Kun Dong,Shaoyu He,Wu Jie, and Jiaxing Huang

Product: RTP2201 瓊脂糖凝膠回收試劑盒

Journal: Journal of Insect Science (2021) 21(5): 13; 1–8

InstitutionInstitute of Apicultural Research, Chinese Academy of Agricultural Sciences

Paper linkhttps://doi.org/10.1093/jisesa/ieab078

 

8. [2022 IF= 1.7] VvAGAMOUS Affect Development of Four Different Grape Species Ovary.

Author: Pengfei Zhang, Yuqin Zhang1, Qifeng Zhao, Tiequan Niu, Pengfei Wen and Jinjun Liang

Product: RTP2201 瓊脂糖凝膠回收試劑盒

Journal: Phyton-International Journal of Experimental Botany (2023) , vol.92, no.4

InstitutionCollege of Horticulture, Shanxi Agricultural University

Paper linkhttps://doi.org/10.32604/phyton.2023.026227

 


 
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