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寬分子量非變性電泳蛋白質(zhì)Marker 21-880 kD

寬分子量非變性電泳蛋白質(zhì)Marker 21-880 kD

產(chǎn)品編號(hào):RTD6144

產(chǎn)品規(guī)格:20次

數(shù)量
價(jià)格 ¥600

購買前先必讀

非變性蛋白電泳Marker轉(zhuǎn)膜問題

http://hnyjdw.com/news_detail.aspx?NewsID=248



寬分子量非變性電泳蛋白質(zhì)Marker21-880 kD

Broad MW Native Electrophoresis Protein Marker21-880 kD

●產(chǎn)品編號(hào)及規(guī)格:

RTD6144   20次 100 μl

●儲(chǔ)存及運(yùn)輸條件:

-20℃保存,濕冰運(yùn)輸,有效期為12個(gè)月。

產(chǎn)品簡(jiǎn)介:

    本產(chǎn)品有5種蛋白組成,分子量范圍為21-880 kD,經(jīng)過非變性電泳后,用考馬斯亮藍(lán)染色后可以得到5條主帶。

蛋白名稱

分子量(kD)

蛋白來源

pI

說明

Ferritin

440

880

equine spleen

N/A

非變性下440kD880 kD

Carbonic Anhydrase

300

Bovine Erythrocytes

6.4

單體分子量29kD,非變性下為10聚體,低于300kD有電荷異構(gòu)體(charge isomer

Lactic Dehydrogenase

165

Microorganism

4.5

球蛋白,單體分子量36 kD,非變性下可形成四聚體

Ovalbumin

45

egg white

4.714.59

球蛋白,分子量為45kD,非變性條件下大于45kD會(huì)出現(xiàn)電荷異構(gòu)體(charge isomer

Trypsin Inhibitor

21

Soybean

4.5

非變性下21 kD

使用說明:

1. 取出產(chǎn)品后,常溫融化后,徹底混勻,上樣電泳。

注:上樣量根據(jù)膠的厚度和梳子的寬度確定。一般說來,1.0厚度10齒梳子加樣孔上樣5 μl,1.0厚度15齒梳子加樣孔上樣量2.5 μl,其他規(guī)格梳子請(qǐng)適當(dāng)調(diào)整上樣量。

2. 該產(chǎn)品不含蛋白凝膠制備試劑,您可以選擇非變性PAGE凝膠制備及電泳試劑盒(貨號(hào):RTD6130)或者蛋白預(yù)制膠(貨號(hào)RTD6118)。如自備試劑,經(jīng)典Laemmli系統(tǒng)中把制膠溶液、電泳緩沖液和上樣緩沖液中的SDS和還原劑(DTT或β-巰基乙醇)全部去除即可進(jìn)行非變性電泳。

3. 電泳條件:

建議使用10%非變性膠或者4-20%梯度非變性膠(貨號(hào):RTD6118-0420)進(jìn)行電泳。

恒電壓

120 V

起始電流

27-35 mA/板膠

結(jié)束電流

7-10 mA/板膠

電泳時(shí)間

1h20min+

4. 電泳結(jié)束后,考馬斯亮藍(lán)染色,觀察結(jié)果。

注:使用銀染染色時(shí),由于靈敏度高于考馬斯亮藍(lán)染色方法,需要適當(dāng)降低Marker上樣量,一般稀釋50倍后上樣。

注意:

1. 本蛋白Marker不適用于變性蛋白電泳(SDS-PAGE),因?yàn)樵?/span>SDS存在下,含有多個(gè)亞單位的蛋白會(huì)不同程度解聚。

2. 在非變性條件下,蛋白的遷移與蛋白的電荷、蛋白形狀以及蛋白分子量都有關(guān)。因此,在一種凝膠濃度下使用本Marker不能精確估計(jì)出目的蛋白的分子量。非變性電泳中,蛋白分子量的確定應(yīng)該是在不同凝膠濃度下,確定出蛋白的Rf值,繪制出凝膠濃度對(duì)Rf的曲線從而判定蛋白的分子量。

● 實(shí)驗(yàn)示例:

1 4-20% Tris-甘氨酸 非變性膠電泳:


    4-20% RealPAGE Precast Gel
1×TG 200V 50-19mA  47min

2. 4-16% Blue Native:


3: 4-15% Tris-甘氨酸非變性:




 
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