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非變性電泳蛋白質(zhì)Marker(45-880 kD)

非變性電泳蛋白質(zhì)Marker(45-880 kD)

產(chǎn)品編號:RTD6137

產(chǎn)品規(guī)格:20次

數(shù)量
價格 ¥500

購買前先必讀

非變性蛋白電泳Marker轉(zhuǎn)膜問題

http://hnyjdw.com/news_detail.aspx?NewsID=248


非變性電泳蛋白質(zhì)Marker45-880 kD

Native Electrophoresis Protein Marker45-880 kD

●產(chǎn)品編號及規(guī)格:

RTD6137   20次 100 μl

●儲存及運輸條件:

-20℃保存,濕冰運輸,有效期為12個月。

產(chǎn)品簡介:

    本產(chǎn)品有4種蛋白組成,分子量范圍為45-880 kD,經(jīng)過非變性電泳后,用考馬斯亮藍染色后可以得到5條主帶。

蛋白名稱

分子量(kD)

蛋白來源

pI

說明

Ferritin

440

880

equine spleen

N/A

非變性下440kD880 kD

Carbonic Anhydrase

300

Bovine Erythrocytes

6.4

單體分子量29kD,非變性下為聚體,表現(xiàn)為多種電荷異構(gòu)體(charge isomer

Albumin

66

bovine serum

4.6-5.8

球蛋白,單體分子量66 kD,非變性下可形成少量二聚體

Ovalbumin

45

egg white

4.71

4.59

球蛋白,分子量為45kD,非變性條件下大于45kD會出現(xiàn)電荷異構(gòu)體(charge isomer

使用說明:

1. 取出產(chǎn)品后,常溫融化后,徹底混勻,上樣電泳。

注:上樣量根據(jù)膠的厚度和梳子的寬度確定。一般說來,1.0厚度10齒梳子加樣孔上樣5 μl,1.0厚度15齒梳子加樣孔上樣量2.5 μl,其他規(guī)格梳子請適當調(diào)整上樣量。

2. 該產(chǎn)品不含蛋白凝膠制備試劑,您可以選擇非變性PAGE凝膠制備及電泳試劑盒(貨號:RTD6130)或者蛋白預制膠(貨號RTD6118)。如自備試劑,經(jīng)典Laemmli系統(tǒng)中把制膠溶液、電泳緩沖液和上樣緩沖液中的SDS和還原劑(DTT或β-巰基乙醇)全部去除即可進行非變性電泳。

3. 電泳條件:

建議使用8%非變性等度膠或者4-15%非變性梯度膠進行電泳。

恒電壓

150-200 V

起始電流

27-35 mA/板膠

結(jié)束電流

7-10 mA/板膠

電泳時間

50-80min+

4. 電泳結(jié)束后,考馬斯亮藍染色,觀察結(jié)果。

注:使用銀染染色時,由于靈敏度高于考馬斯亮藍染色方法,需要適當降低Marker上樣量,一般稀釋50倍后上樣。

注意:

1.本蛋白Marker不適用于變性蛋白電泳(SDS-PAGE)。
2. 蛋白非變性電泳條件下,不能精確判斷蛋白的分子量大小。因為在非變性條件下,蛋白的電荷,空間結(jié)構(gòu),物化性質(zhì)等都對蛋白的遷移有影響。
3.非變性蛋白電泳Marker(RTD6137,RTD6142,RTD6144)由于要保持蛋白的天然結(jié)構(gòu),都沒有偶聯(lián)染料,在電泳時基本都看不到條帶;然而,RTD6137和RTD6144中的440 kD和880 kD由于天然蛋白中含有鐵離子,使得電泳后在膠上可見淡黃色,其中440 kD顏色更深。凝膠轉(zhuǎn)膜后,膜上也可以看到黃色的440 kD條帶,可以大體判斷Marker轉(zhuǎn)膜的效果。
4. 非變性Marker轉(zhuǎn)膜后可以后用麗春紅染色液(貨號:RTD6301)染膜,可以看到Marker條帶,順便可以檢測轉(zhuǎn)膜效率,然而要注意的是麗春紅染色靈敏度比較低,可能不能完全看到完整的Marker條帶。

● 實驗示例:

 





使用RTD6137非變性電泳蛋白質(zhì)Marker45-880 kD產(chǎn)品發(fā)表部分文章列表:

1. [2022 IF=8.0] Tektin bundle interacting protein, TEKTIP1, functions to stabilize the tektin bundle and axoneme in mouse sperm flagella

Author: Xin?Yan Geng,Hui?Juan Jin, Lan Xia.Bin?Bin Wang,Su?Ren Chen

Marker: RTD6137非變性電泳蛋白質(zhì)Marker(45-880 kD)

Journal: Cellular and Molecular Life Sciences (2024) 81:118 

Institution: Beijing Normal University

Paper linkhttps://doi.org/10.1007/s00018-023-05081-3


 
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