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RealECL發(fā)光液

RealECL發(fā)光液

產(chǎn)品編號(hào):EC2520-01

產(chǎn)品規(guī)格:25ml

相關(guān)規(guī)格:
數(shù)量
價(jià)格 ¥100


RealECL發(fā)光液                 Ver.740574

產(chǎn)品組成:

貨號(hào)

名稱

規(guī)格

保存條件

EC2520-01

RealECL發(fā)光液

25 ml

2-8

EC2520-02

RealECL發(fā)光液

100 ml

2-8

EC2520-03

RealECL發(fā)光液

500 ml

2-8

說(shuō)明書(shū)

一份

產(chǎn)品簡(jiǎn)介:

RealECL 是一種超敏ECL化學(xué)發(fā)光試劑盒,可與二抗上耦連的辣根過(guò)氧化物酶(HRP)發(fā)生化學(xué)反應(yīng),發(fā)出熒光,從而可以通過(guò)用X光片壓片或其它適當(dāng)熒光成像設(shè)備檢測(cè)樣品。RealECL具有極高靈敏度和高信噪比,可檢測(cè)出10-100 fg的微量抗原;發(fā)光迅速,熒光可使X感光膠片感光達(dá)1小時(shí)以上,特別適用于痕量蛋白檢測(cè);另外高靈敏度可以大大節(jié)省寶貴的樣品以及非常昂貴的一抗和二抗的用量,降低實(shí)驗(yàn)成本。

貯存、運(yùn)輸及效期:

  2-8貯存;有效期一年;濕冰運(yùn)輸。

注意事項(xiàng):

1. RealECL A液和B液在吸取過(guò)程中必須要更換槍頭,A液和B液相互污染后會(huì)導(dǎo)致A液或B液逐漸失效,影響后續(xù)的使用效果。

2. 各溶液使用后,請(qǐng)蓋緊瓶蓋,以防失效。

3. 為獲得最佳實(shí)驗(yàn)結(jié)果,請(qǐng)務(wù)必優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件,包括檢測(cè)樣品的用量、一抗、二抗稀釋度、雜交膜及封閉試劑的選擇。

4. 由于疊氮鈉是HRP抑制劑,在緩沖液中應(yīng)避免使用疊氮鈉作為防腐劑;如果二抗中含有疊氮鈉,發(fā)光實(shí)驗(yàn)前要進(jìn)行5次TBST或PBST漂洗,每次10分鐘。

5. 在與膜發(fā)生接觸過(guò)程中,請(qǐng)佩戴手套且使用干凈鑷子等潔凈器材,避免蛋白污染產(chǎn)生高背景。

使用說(shuō)明:

1. RealECL工作液的配制:等體積混合適量RealECL A液和B液,常溫放置備用。工作液宜在臨檢測(cè)前配制。

2. Western二抗孵育后,進(jìn)行數(shù)次洗滌,用平頭塑料鑷子將膜取出,用濾紙略吸去過(guò)多的液體(切勿接觸膜的蛋白面),但不要使膜過(guò)度干燥,然后將膜平鋪于一潔凈保鮮膜上,避免產(chǎn)生氣泡。

注:某些市售保鮮膜包裹印跡膜時(shí)會(huì)淬滅熒光,請(qǐng)選擇ECL專用保鮮膜獲得更好的實(shí)驗(yàn)效果。

3. 根據(jù)膜的大小,按每平方厘米膜加0.125 ml RealECL工作液的比例,滴加RealECL工作液到膜上,確保使工作液均勻覆蓋在膜上,常溫放置1-2分鐘。

注:為達(dá)節(jié)約目的可將膜減小但勿降低發(fā)光液用量,確保發(fā)光液完全覆蓋于膜上。

4.將保鮮膜折起來(lái)完全包裹雜交膜,去除氣泡和皺褶,可剪去邊緣部多余的保鮮膜。用濾紙吸去多余的發(fā)光工作液。

5.可以使用ECL發(fā)光檢測(cè)儀器或暗室曝光。用膠帶將覆蓋雜交膜的保鮮膜固定在暗盒內(nèi),在黑暗中放入X感光膠片,分別曝光不同的時(shí)間如數(shù)秒到數(shù)分鐘,顯影定影觀察沖洗結(jié)果。如掌握不好曝光時(shí)間,可以在膜上放置3-4張X感光膠片,統(tǒng)一曝光3-5分鐘,顯影后選擇一張曝光最好的膠片。


應(yīng)用示例:

綠蘿總蛋白,RbcL一抗 1:2000,羊抗兔IgG-HRP 1:2000

a PVDF膜用抗體清除液處理后再用RealECL曝光。


 
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