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快速銅染蛋白染色試劑盒

快速銅染蛋白染色試劑盒

產(chǎn)品編號(hào):RTD6207

產(chǎn)品規(guī)格:10次

數(shù)量
價(jià)格 ¥300

快速蛋白銅染試劑盒

產(chǎn)品編號(hào)

規(guī)格

運(yùn)輸

RTD6207

10 T

RT

產(chǎn)品簡(jiǎn)介:                                                    

本試劑采用以銅離子為基礎(chǔ)的負(fù)染色方法,用于SDS-PAGE或Native-PAGE電泳凝膠染色,不需要使用含有刺激性的甲醛和冰醋酸,實(shí)驗(yàn)方便快速,可以在30 min左右完成,最低能夠檢測(cè)出2 ng的蛋白條帶,該方法不對(duì)蛋白質(zhì)產(chǎn)生修飾作用,而且經(jīng)過(guò)脫色液處理后,可以用于電洗脫或采用PAGE膠蛋白微量回收試劑盒(貨號(hào):RTD8108)進(jìn)行膠回收,以便進(jìn)行質(zhì)譜和測(cè)序分析等,也可以用于電轉(zhuǎn)移或用其他染色方法(銀染或考染)對(duì)膠重新染色。

按照每次使用50 ml1×即用型染色液計(jì)算,本產(chǎn)品可以染色 8-10塊mini-PAGE(8×10cm)膠。

產(chǎn)品組成:

產(chǎn)品編號(hào)

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貯存

運(yùn)輸

RTD6207-01

增強(qiáng)液(4×)

100 ml

4-8

RT

RTD6207-02

染色液(10×)

60 ml

4-8

RT

RTD6207-03

脫色液(10×)

100 ml

4-8

RT

-

說(shuō)明書

1

-

-

儲(chǔ)存條件

按照標(biāo)簽溫度貯存,常溫運(yùn)輸。開封后一年有效。

凝膠染色的操作步驟:

以下步驟以一塊1 mm厚度8×10cm的凝膠操作為例。

. 漂洗:

取出電泳后的 PAGE 凝膠,用超純水漂洗兩次,每次1分鐘。

. 前處理:

2.1 準(zhǔn)備工作:將增強(qiáng)液(4×)用超純水稀釋4倍,配成1×增強(qiáng)液。

2.2 凝膠中加入50 ml 1×增強(qiáng)液,常溫?fù)u床慢搖10分鐘。

. 漂洗:

棄增強(qiáng)液,用超純水漂洗凝膠兩次,每次10-20秒,至泡沫完全清除干凈。

注:漂洗時(shí)間不要太長(zhǎng),否則會(huì)導(dǎo)致染色效果下降。

. 染色:

4.1 準(zhǔn)備工作:將染色液(10×)用超純水稀釋10倍,配成1×即用型染色液。

    注:染色液略成半渾濁狀態(tài)。

4.2凝膠中加入 50 ml 1×即用型染色液,搖床慢搖5-10分鐘,觀察結(jié)果:在黑色背景下,可見光觀察,蛋白條帶為棕褐色,無(wú)蛋白區(qū)域?yàn)樗{(lán)綠色;可見光燈箱觀察(凝膠底部打光),蛋白質(zhì)條帶反顯白色,無(wú)蛋白的膠區(qū)則為黃綠色。

. 漂洗:

棄染色液,超純水洗滌凝膠2次,每次搖床慢搖1分鐘。

注:凝膠可以在水中保存1-2周。

. 脫色:

6.1 準(zhǔn)備工作:將脫色液(10×)用超純水稀釋10倍,配成1×即用型脫色液。

6.2 如需要進(jìn)行蛋白切膠回收,將所需的蛋白質(zhì)條帶切下,用超純水漂洗切下的凝膠一次;如凝膠需要考染,銀染或轉(zhuǎn)膜實(shí)驗(yàn),直接用超純水漂洗整個(gè)凝膠一次。

6.3 棄水,凝膠中加入適量1×即用型脫色液覆蓋凝膠,搖床慢搖5分鐘,倒掉脫色液;

6.4 重復(fù)脫色步驟2次。脫色完全的標(biāo)志是白色凝膠完全脫色為無(wú)色透明。

6.5 超純水漂洗凝膠兩次,進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)操作。

實(shí)驗(yàn)示例:

4-20% RealPAGE Precast Gel

 

lane 1-5: BSA分別為1,2,3,4,5μg

 

M:RTD6149 10-250kD

 

lane 6: Bacterial Lysis

 

凝膠顯影后(脫色前)蛋白條帶在黑色背景下為藍(lán)綠色(左)

 

可見光燈箱觀察(凝膠底部打光),蛋白質(zhì)條帶反顯白色(右)



 
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