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考馬斯亮藍蛋白染色液 常規(guī)法

考馬斯亮藍蛋白染色液 常規(guī)法

產(chǎn)品編號:RTD6203

產(chǎn)品規(guī)格:250ml

數(shù)量
價格 ¥100

考馬斯亮藍染色液(常規(guī)法)

產(chǎn)品編號

規(guī)格

貯存

RTD6203

250ml

常溫

儲存條件

常溫保存,開封后一年有效。

產(chǎn)品簡介

考馬斯亮藍染色液(Commassie Blue Staining Solution)是以考馬斯亮藍G-250為主要成分,采用新配方配置而成??捎糜赟DS-PAGE或非變性PAGE膠(native gel)的染色。采用常規(guī)染色方法需至少1小時可以完成染色;采用快速染色方法數(shù)分鐘即可完成染色。本染色液經(jīng)過改良,不含有毒的甲醇,但含有刺激性氣味的乙酸。

使用說明:

常規(guī)染色脫色方法

1.  電泳結束后,取凝膠放入適量考馬斯亮藍染色液中,確保染色液可以充分覆蓋凝膠。

2.  置于水平搖床或側(cè)擺搖床上緩慢搖動,室溫染色1小時或更長時間。

    注:具體的染色時間取決于凝膠的厚度和染色時的溫度。凝膠較厚,溫度較低,則染色時間宜適當延長。凝膠較薄,溫度較高,則染色時間可以適當縮短。通常染色至凝膠的顏色和染色液的顏色非常接近,在染色液中幾乎看不清凝膠時,可以認為已染色充分。染色2-4個小時或更長時間不會對最終的染色效果產(chǎn)生負面影響。

3.  倒出染色液。染色液可以回收重復使用至少2-3次。

4.  加入適量脫色液,確保脫色液可以充分覆蓋凝膠。

    注:脫色液可以使用考馬斯亮藍脫色液(RTD6204);如果希望自行配制,推薦的脫色液配方為:40%乙醇,10%乙酸,50%蒸餾水。

5.  置于水平搖床或側(cè)擺搖床上緩慢搖動,室溫脫色4-24小時。期間更換脫色液2-4次,直至藍色背景基本上全部被脫去,并且蛋白條帶染色效果達到預期。通常蛋白條帶在脫色1-2小時后即可出現(xiàn)。

注:脫色期間可以在脫色液中加入一片吸水紙,可以使部分染料吸附在吸水紙上,加快脫色。脫色時間過長也會導致蛋白條帶的顏色變淺。

6. 完成脫色后,可以把凝膠保存在水中,用于后續(xù)的拍照等。保存在水中的凝膠會發(fā)生溶漲。如需避免溶漲,可以把膠保存在含20%甘油的水中。長期保存可以制備干膠。

快速染色脫色方法

1.  電泳結束后,取膠放入適量考馬斯亮藍染色液中,微波爐加熱至接近沸騰或剛剛沸騰,立即停止加熱。通常對于膠濃度大于10%的膠比較堅韌,在發(fā)生煮沸時不易破損;對于膠濃度小于10%的膠,宜盡量避免煮沸,以免出現(xiàn)膠碎裂的情況。

2.  隨后在染色液溫度較高的情況下,在室溫搖床上搖動5-10分鐘。

3.  倒出染色液。染色液可以回收重復使用至少2-3次。

4.  加入適量脫色液,確保染色液可以充分覆蓋凝膠。

   注:脫色液可以使用考馬斯亮藍染色脫色液(RTD6204);如果希望自行配制,推薦的脫色液配方為:40%乙醇,10%乙酸,50%蒸餾水。

5.  微波爐加熱至接近沸騰或剛剛沸騰,立即停止加熱。

6.  隨后在脫色液溫度較高的情況下,在搖床上搖動5-10分鐘。此時通常可以觀察到比較清楚的蛋白條帶。

7.  更換新鮮的脫色液,重復步驟5和步驟6,直至藍色背景基本上全部被脫去,蛋白條帶染色效果達到預期。

8.  完成脫色后,可以把凝膠保存在水中,用于后續(xù)的拍照等。保存在水中的凝膠會發(fā)生溶漲。如需避免溶漲,可以把膠保存在含20%甘油的水中。長期保存可以制備干膠。  


 
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