国产亚洲美女精品久久久2020_无码人妻精品一区二区三区久久久_中文无码在线观看高清免费_精品无人乱码一区二区三区

您好,歡迎光臨中科瑞泰!

免費(fèi)咨詢電話:
400-699-0631

首頁(yè) > 蛋白生物學(xué) > 蛋白Marker > 多肽電泳Marker

彩虹預(yù)染超低分子量蛋白質(zhì)Marker III(1.5-45 kD)

彩虹預(yù)染超低分子量蛋白質(zhì)Marker III(1.5-45 kD)

產(chǎn)品編號(hào):RTD6147

產(chǎn)品規(guī)格:10次

數(shù)量
價(jià)格 ¥300

彩虹預(yù)染超低分子量蛋白質(zhì)Marker III1.5-45 kD

Rainbow Prestained Ultra Low Molecular Weight Protein Marker III1.5-45 kD

產(chǎn)品編號(hào)及規(guī)格:

RTD6147   10 T(50 μl)

儲(chǔ)存、運(yùn)輸及效期:

  -20保存,濕冰運(yùn)輸,有效期1年。

產(chǎn)品簡(jiǎn)介:

    彩虹預(yù)染超低分子量蛋白質(zhì)Marker III可以直接觀察蛋白電泳及清晰判斷Western Blotting的轉(zhuǎn)膜效果。本產(chǎn)品由7種多肽和蛋白質(zhì)組成,分子量大小為 1.5 kD,4 kD(紅色),8 kD, 15 kD(綠色),20 kD, 30 kD,45 kD (注:蛋白大小已在18%Tricine-SDS-PAGE中用非預(yù)染蛋白Marker標(biāo)定過(guò)。)


● 使用說(shuō)明:

第一次收到該產(chǎn)品,常溫融化后,徹底混勻,離心快甩將溶液完全收集到管底

. 制膠:

說(shuō)明:可以根據(jù)以下步驟自己制備凝膠。也可以選擇Tris-Tricine-PAGE凝膠制備及電泳試劑盒(貨號(hào):RTD6122進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

1.1 配制分離膠

1.1.1 按照表1將組份加入到小燒杯中混合。

1.1.2加入10%APS和TEMED,立即混勻5-10秒,以使溶液充分混勻。

1.1.3 在玻璃板中迅速灌入適量分離膠溶液,使液面和短玻璃板上沿之間的距離比梳齒長(zhǎng)0.5 cm即可(注:此溶液為過(guò)量,請(qǐng)勿全部注入)。然后在分離膠溶液上輕輕覆蓋一層1-2 cm的無(wú)水乙醇,使凝膠表面保持平整。

1.1.4 靜置15-30分鐘,待分離膠和乙醇層之間出現(xiàn)一個(gè)清晰的界面表示凝膠已聚合。

注:凝膠的聚合時(shí)間與環(huán)境溫度有關(guān)。夏天溫度較高時(shí),聚合較快;冬天氣溫低時(shí),聚合時(shí)間會(huì)延長(zhǎng)??梢愿鶕?jù)表1的標(biāo)準(zhǔn)條件調(diào)節(jié)促凝劑的加入量。分離膠25℃條件下,約20分鐘可以聚合。

(一塊1 mm mini膠用量)

 

分離膠

濃縮膠

 

18T, 5%C /5 ml

5T, 3.3%C/2 ml

40% PAA19:1

2.25 ml

/

40% PAA (29:1)

/

0.25 ml

凝膠緩沖液

1.25 ml

0.5 ml

乙二醇(電泳級(jí))

1.5 ml

/

ddH2O

/

1.25ml

10APS

50 μl

20 μl

TEMED

5 μl

2 μl

1.2 配制濃縮膠

1.2.1 去除覆蓋在分離膠上的乙醇層,用濾紙將殘留乙醇吸去。

1.2.2 按照表1將各組份加入到小燒杯中混合。

1.2.3 加入10%過(guò)硫酸銨和TEMED,立即混勻5-10秒,以使溶液充分混勻。

1.2.4 將梳子插入凝膠內(nèi),避免產(chǎn)生氣泡。

1.2.5 靜置30-60分鐘裝待凝膠聚合

注:凝膠的聚合時(shí)間與環(huán)境溫度有關(guān)。夏天溫度較高時(shí),聚合較快;冬天氣溫低時(shí),聚合時(shí)間會(huì)延長(zhǎng)??梢愿鶕?jù)表1的標(biāo)準(zhǔn)條件調(diào)節(jié)促凝劑的加入量。濃縮膠25℃條件下,約40分鐘可以聚合。

. 電泳:

2.1 取Marker樣品,充分混勻后備用。不要加熱處理。

2.2 電泳前,將10×陽(yáng)極緩沖液(Cat No:AB080)和10×陰極緩沖液(Cat No:CB010)用蒸餾水稀釋成1×緩沖液備用。將電泳槽的外槽加入1×陽(yáng)極緩沖液,內(nèi)槽加入1×陰極緩沖液,輕柔拔出梳子,將Marker或蛋白樣品(已經(jīng)過(guò)2×Tricine上樣緩沖液[Cat No:TP050]處理)加入點(diǎn)樣孔,參考下表進(jìn)行電泳,至每條帶都清晰可見(jiàn)時(shí)停止電泳。整個(gè)電泳過(guò)程大約需要2-3個(gè)小時(shí)。

2 多肽電泳條件

恒電壓

150V

起始電流

60-75mA/板膠

結(jié)束電流

15-25mA/板膠

電泳時(shí)間

2-3小時(shí)

. 染色

根據(jù)常規(guī)實(shí)驗(yàn)步驟,用配方6和7(表3)進(jìn)行染色和觀察。如果使用配方6進(jìn)行染色時(shí)效果不好或考慮其毒性,請(qǐng)選擇本公司的FastBlue蛋白染色液(Cat NoRTD6202,該產(chǎn)品除具有染色快,無(wú)毒,靈敏性高等特點(diǎn)外,還能對(duì)小肽在染色中起到固定作用,不至于小肽在染色和脫色中從凝膠中脫離,是常規(guī)染色液的理想替代品。

3 小分子蛋白質(zhì)SDS-PAGE電泳試劑配制

1. 40%PAA29:1)(配制濃縮膠)   

貨號(hào): AC2914

   丙稀酰胺       38.67g

   甲叉雙丙稀酰胺 1.33g

 ddH2O溶解后定容至100 ml,過(guò)濾后使用。

貯存:4

2.  40% PAA19:1 (配制分離膠)

貨號(hào):AC1914

丙稀酰胺      38 g

甲叉雙丙稀酰胺 2 g

ddH2O溶解后定容至100 ml,過(guò)濾后使用。

貯存:4

3. 4×凝膠緩沖液(配制凝膠用)

貨號(hào):GB010

[3 M Tris; 0.4% SDS; pH8.45]

Tris 36.3 g;ddH2O 80ml

0.4 g SDS4 ml 10 SDS

HCl調(diào)pH值至8.45;用ddH2O定容至100 ml

貯存:4

4. 10×陽(yáng)極緩沖液(下槽緩沖液)

貨號(hào):AB080

[2 M Tris pH8.9]

Tris 121.1g;ddH2O 400ml;用HCl調(diào)pH值至8.9;用ddH2O定容至500ml

貯存:4

注:使用前稀釋成陽(yáng)極緩沖液使用。

5. 10×陰極緩沖液(上槽緩沖液)

貨號(hào):CB010

[1 M Tris; 1 M Tricine ;1% SDS; pH 8.3]

Tris 121.14g;Tricine 179.2g;SDS 10 g

ddH2O溶解,定容至1000 ml(不用調(diào)pH)。

貯存:4

注:使用前稀釋成陰極緩沖液使用

6. 染色液

貨號(hào):RTD6203

冰醋酸            100 ml

考馬斯亮藍(lán)G-250   0.25 g

                900 ml

 

 

7. 脫色液

貨號(hào):RTD6204

冰醋酸  100 ml

      900 ml

 

8.  2×Tricine蛋白樣品上樣緩沖液(10ml

貨號(hào):TP050

1ml1MTris-HCl pH6.82.4 ml 甘油;0.8 g  SDS;0.31 g DTT(或者400 μl β-巰基乙醇);2 mg 考馬斯亮藍(lán)G-250;用滅菌水定容至10ml

混勻分裝-20貯存?zhèn)溆?/span>

 

 


 
只有購(gòu)買過(guò)該商品的用戶才能進(jìn)行評(píng)價(jià)。[發(fā)表評(píng)價(jià)]
国产亚洲美女精品久久久2020_无码人妻精品一区二区三区久久久_中文无码在线观看高清免费_精品无人乱码一区二区三区