寬分子量非變性電泳蛋白質(zhì)Marker
II(21-880 kD)
Broad MW Native
Electrophoresis Protein Marker II(21-880 kD)
名稱
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貨號
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規(guī)格
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寬分子量非變性電泳蛋白質(zhì)Marker II(21-880
kD)
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RTD6136
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20次(100
μl)
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●儲存、運輸及效期:
-20℃保存,濕冰運輸,有效期為12個月。
● 產(chǎn)品簡介:
本產(chǎn)品有5種蛋白組成,分子量范圍為21-880
kD,經(jīng)過非變性電泳后,用考馬斯亮藍染色后可以得到6條主帶。
蛋白名稱
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分子量(kD)
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蛋白來源
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pI
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說明
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Ferritin
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440
880
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equine
spleen
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N/A
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非變性下440kD和880
kD
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RC2
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200
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重組蛋白
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6.7
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單體蛋白分子量為75
kD,在Tris-甘氨酸非變性下表現(xiàn)為分子量~200
kD
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RC1
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75
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重組蛋白
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5.9
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單體蛋白分子量為75 kD,在Tris-甘氨酸非變性下表現(xiàn)為分子量~75 kD,同時會形成少量二聚體(dimer)
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Ovalbumin
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45
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egg
white
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5.2
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球蛋白,分子量為45kD,非變性條件下大于45 kD會出現(xiàn)電荷異構體(charge
isomer)
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Trypsin
Inhibitor
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21
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Soybean
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4.5
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非變性下21 kD
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● 使用說明:
1. 取出產(chǎn)品后,常溫融化后,徹底混勻,上樣電泳。
注:上樣量根據(jù)膠的厚度和梳子的寬度確定。一般說來,1.0厚度10齒梳子加樣孔上樣5 μl,1.0厚度15齒梳子加樣孔上樣量2.5 μl,其他規(guī)格梳子請適當調(diào)整上樣量。
2. 該產(chǎn)品不含蛋白凝膠制備試劑,您可以選擇非變性PAGE凝膠制備及電泳試劑盒(貨號:
RTD6130或RTD6135)。如自備試劑,經(jīng)典Laemmli系統(tǒng)中把制膠溶液、電泳緩沖液和上樣緩沖液中的SDS和還原劑(DTT或β-巰基乙醇)全部去除即可進行非變性電泳。
3. 電泳條件:
建議使用10%非變性膠或者4-15%梯度非變性膠(貨號:RTD6117-0415)進行電泳。
恒電壓
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120 V
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起始電流
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27-35 mA/板膠
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結束電流
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7-10 mA/板膠
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電泳時間
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1h20min+
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4. 電泳結束后,考馬斯亮藍染色,觀察結果。
注:使用銀染染色時,由于靈敏度高于考馬斯亮藍染色方法,需要適當降低Marker上樣量,一般稀釋50倍后上樣。
注意:
1. 本蛋白Marker不適用于變性蛋白電泳(SDS-PAGE),因為在SDS存在下,含有多個亞單位的蛋白會不同程度解聚。
2. 在非變性條件下,蛋白的遷移與蛋白的電荷、蛋白形狀以及蛋白分子量都有關,因此不能精確判斷待測蛋白的分子量,只能粗略判斷蛋白的大小。
● 實驗示例:
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4-15% Tris-Glycine
Native Gel
電泳條件:1×TG 200V 50-19mA 47 min
染色:FastBlue蛋白染色液,20min
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